en القای کالوس و تولید ویتانولیدها از طریق کشت سوسپانسیون سلولی گیاه دارویی پنیرباد گياهان دارویی Medicinal Plants پژوهشی Research <div style="text-align: justify;">مقدمه: گیاه پنیرباد <span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">(<i>Withania coagulans</i> (Stocks) Dunal) </span></span>به دلیل خصوصیات درمانی فراوان، یک گیاه دارویی شناخته شده است. هدف: در این مطالعه، القای کالوس نرم و ایجاد کشت سوسپانسیون سلولی گیاه به منظور تولید ویتانولیدهای مهم ویتافرین A و ویتانولید A انجام شد. روش بررسی: القای کالوس در گیاه با استفاده از ریزنمونه‌های برگ و میانگره بر روی محیط کشت موراشیگ و اسکوگ (اِم اِس) دارای غلظت‌های مختلف (صفر، 1 ،1/5 ،2 ،و 2/5 میلی‌گرم بر لیتر) اکسین‌های توفوردی، نفتالن استیک اسید و ایندول استیک اسید به تنهایی یا در ترکیب با هورمون بنزیل آمینو پورین (صفر، 0/5 و 1 میلی‌گرم بر لیتر) در قالب آزمایش فاکتوریل بر پایه کاملاً تصادفی با پنج تکرار انجام شد. سپس ایجاد کشت سوسپانسیون سلولی به منظور تولید ویتانولیدها انجام شد. نتایج: درصد کالوسزایی در ریزنمونه برگ (25 تا 96%) بیشتر از ریزنمونه میانگره (23/2 تا 85/4%) بود. درصد بالایی از کالوس نرم از ریزنمونه برگ کشت شده بر روی محیط کشت MS همراه با 0/5 میلی‌گرم توفوردی و 0/5 میلی‌گرم بنزیل آمینو پورین بدست آمد. کشت سوسپانسیون سلولی از کالوس‌های نرم روی محیط کشت MS همراه با 1/5 میلی‌گرم بر لیتر ایندول استیک اسید و 0/5 میلی‌گرم بر لیتر بنزیل آمینو پورین ایجاد گردید. بیشترین تجمع زیست‌توده (172 گرم بر لیتر وزن تر و 15 گرم بر لیتر وزن خشک) و تولید هر دو ویتانولید در هفته چهارم کشت مشاهده شد. سلول‌های گیاه در این زمان، به ترتیب 0/08 و 21 میکروگرم بر لیتر ویتافرین A و ویتانولید A تولید کردند. نتیجه‌گیری: نتایج این مقاله می‌تواند برای تحقیقات بیشتر بر روی مسیرهای بیوسنتز ویتانولیدها و تولید آنها در بیوراکتور مورد استفاده قرار گیرد.</div> <div style="text-align: justify;"><b><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">Background:</span></span></span></b> <i><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Withania coagulans</span></span></i><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""> (Stocks) Dunal is a well-known medicinal plant due to its many healing properties<i>. </i><b>Objective:</b><span style="color:black"> The aim of the present study was to induce friable callus and subsequently establish the plant cell suspension cultures for the production of two important withanolides <i>i.e.</i> withaferin A (WFA) and withanolide A (WNA). </span><b>Methods:</b><i> In vitro</i> callus induction was carried out from young leaf and internodal explants cultured on MS medium fortified with various concentrations (0, 1.0, 1.5, 2.0 and 2.5 mg/L) of auxins (2,4-D, NAA, and IAA) solely or in combination with BAP (0., 0.5 and 1.0 mg/L) in a factorial experiment based on a completely randomized design with five replications. The plant cell culture was then established for the production of both withanolides. <b>Results:</b> </span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">The percentage of callogenesis from the leaf (25.0-96.0 %) was higher than internodal explants (</span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">23.2-85.4 %</span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">). The </span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">high percentage of friable calli was achieved from leaf explants cultured on MS medium fortified with 2.5 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L BAP. Cell suspension culture was established from derived friable callus cultured on MS medium supplemented with 1.5 mg/L IAA + 0.5 mg/L BAP. </span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">The highest accumulation of biomass (172 g/L fresh weight and 15 g/L dry weight) and the production of both withanolides were observed in the fourth week of the culture period. </span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">The plant cells produced 0.08 and 21 &micro;g/L WFA and WNA at this time, respectively. </span></span><b><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Conclusion</span></span></b><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">: </span></span><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">These results can be used for future research on biosynthesis pathways of withanolides as well as their production in bioreactors.</span></span></div> پنیرباد, کشت سوسپانسیون سلولی, کالوس‎زایی, سولاناسه, متابولیت‎های ثانویه Withania coagulans, Cell suspension establishment, Callogenesis, Solanaceae, Specialized metabolites 79 91 http://jmp.ir/browse.php?a_code=A-10-347-4&slc_lang=en&sid=1 Mohammad Hossein Mirjalili محمدحسین میرجلیلی m-mirjalili@sbu.ac.ir 100319475328460042585 100319475328460042585 Yes Department of Agriculture, Medicinal Plants and Drugs Research Institute, Shahid Beheshti University, 1983969411, Tehran, Iran گروه کشاورزی، پژوهشکده گیاهان و مواد اولیه دارویی، دانشگاه شهید بهشتی، تهران، ایران Hassan Esmaeili حسن اسماعیلی h.esmaili_6007@yahoo.com 100319475328460042586 100319475328460042586 No Department of Agriculture, Medicinal Plants and Drugs Research Institute, Shahid Beheshti University, 1983969411, Tehran, Iran گروه کشاورزی، پژوهشکده گیاهان و مواد اولیه دارویی، دانشگاه شهید بهشتی، تهران، ایران