fa ارزیابی فیتوشیمیایی و ژنومی گیاه دارویی چویر (<i>Ferulago angulata</i>) در شرایط مختلف کشت درون شیشه ای بيوتكنولوژی Biotechnology پژوهشی Research <div style="text-align: justify;"><strong><span style="font-family:b nazanin;">مقدمه:</span></strong><span style="font-family:b nazanin;">چویر </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">(<em>Ferulago angulata</em>)</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;">از گیاهان دارویی در معرض انقراض و متعلق به خانواده </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Appiaceae</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;">می&shy;باشد که با دارا بودن اثرات ضدقارچی و ضدباکتریایی</span> <span style="font-family:b nazanin;">به</span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">&shy;</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;">عنوان محافظ طبیعی مواد</span> <span style="font-family:b nazanin;">غذایی کاربرد دارد.</span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-family:b nazanin;">هدف:</span></strong><span style="font-family:b nazanin;">در این تحقیق، اثر شرایط مختلف کشت درون شیشه ای و غلظت&shy;های مختلف تنظیم کننده&shy;های رشدی بر تنوع سوماکلونال و همچنینمیزان متابولیت&shy;های ثانویه گیاه چویر مورد بررسی قرار گرفت.</span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-family:b nazanin;">روش بررسی:</span></strong><span style="font-family:b nazanin;">پس از بهینه سازی القای کالوس گیاه چویر، کالوس&shy;ها به منظور باززاییبه محیط</span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">MS </span></span></span><span style="font-family:b nazanin;">با غلظت های متفاوت </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">NAA</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"> و </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">BA</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;">انتقال داده شدند.اسانس از گیاهان باززاشده و رشد یافته در طبیعت استخراج و برای شناسایی و مشخص شدن نسبت اجزای اسانس از دستگاه&nbsp; </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">GC </span></span></span><span style="font-family:b nazanin;">&nbsp;و </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">GC/MS</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"> استفاده گردید. به منظور بررسی اثر تنظیم کننده های رشد بر وقوع تنوع سوماکلونال، </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">DNA</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"> از نمونه های باززا شده در تیمارهای مختلف هورمونی استخراج شدو الگوی باندی نمونه هایمختلف با استفاده از آغازگرهای </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">ISSR</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;">، </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">SCoT</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"> و </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CBDP</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"> مورد بررسی شد.</span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-family:b nazanin;">نتایج:</span></strong><span style="font-family:b nazanin;">بیشترین درصدتشکیل کالوس(100%) در کشت ریزنمونه ریشه چه در محیط حاوی 2 میلی</span><span dir="LTR"><span style="font-family:b nazanin;">&lrm;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">گرم در لیتر </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">2,4-D</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;">و1 میلی</span><span dir="LTR"><span style="font-family:b nazanin;">&lrm;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">گرم در لیتر </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">BAP</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"> به دست آمد</span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">.</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;">بهترین نرخ باززایی از کالوس حاصل از هیپوکوتیل در محیط حاوی 1/0میلی</span><span dir="LTR"><span style="font-family:b nazanin;">&lrm;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">گرم در لیتر </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">BA</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"> در ترکیب با 5/0 میلی</span><span dir="LTR"><span style="font-family:b nazanin;">&lrm;</span></span><span style="font-family:b nazanin;">گرم در لیتر </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">NAA</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;">مشاهدهشد. گیاهان رشد یافته در شرایط درون شیشه ای حاوی متابولیت&shy;های ثانویه با مقادیر متفاوتی نسبت به گیاهان در رویشگاه طبیعی بودند. <span style="color:red;">بعنوان مثال سطح زیر منحنی برای ترکیب </span></span><span dir="LTR"><span style="color:red;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">&alpha;-Pinene</span></span></span></span><span style="color:red;"><span style="font-family:b nazanin;"> در گیاهان رشد یافته در شرایط طبیعی و حاصل از کشت بافت بترتیب 27 و 53/1 درصد برآورد گردید.</span></span><span style="font-family:b nazanin;"> عملکرد اسانس در گیاهان وحشی و حاصل از باززایی به ترتیب برابر 26/2 و 64/0 میلی&shy;لیتر در 100 گرم ماده خشک بود. بررسی الگوهای باندی حاصل از </span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PCR</span></span></span><span style="font-family:b nazanin;"> بیانگر تفاوت ژنتیکی نمونه ها بود که ناشی از وقوع تنوع حاصل از کشت بافت (تنوع سوماکلونال) می باشد.</span><br> <strong><span dir="RTL"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجه گیری:</span></span></span></strong><span dir="RTL"><span style="font-family:b nazanin;"><span style="font-size:11.0pt;">بطورکلی، محیط درون شیشه&shy;ای باعث ایجاد تغییرات معنی&shy;داری در ژنوم و متابولوم این گیاه شده است.</span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"><strong>Background</strong>:<em>Ferulago Angulata</em> (Known in Iran as Chavir) is &nbsp;an endangered species and belongto Apiaceae family with Anti fugal and anti-bacterial activity that can act as a natural preservator.<br> <strong>Objective:</strong> The present study was done to evaluate the effect of <em>in vitro</em> culture conditions and plant growth regulators on somaclonal variation and the phytochemical content of <em>in vitro</em> regenerated plants.<br> <strong>Methods:</strong> After the callus induction phase, the calli were transferred to Murashige and Skoog(MS) medium supplemented with 1-Naphthaleneacetic acid(NAA) and 6-Benzylaminopurine (BAP) for regeneration stage. The essential oils were extracted by Clevenger apparatus and the yield and composition of essential oils were assayed by GC/Mass. The genomic DNA was isolated from <em>in vitro</em> regenerated plants by CTAB method. Inter-Simple Sequence Repeat (ISSR), Start codon Targeted (SCoT) and CAAT Box Derived Polymorphism (CBDP) molecular markers were used to assess the effect of plant growth regulators on somaclonal variation.<br> <strong>Results: </strong>The highest percentage of callus formation (100%) was obtained via radicle explant in MS medium supplemented with 2 mg/L 2,4-D and 1mg/L BAP. Also, maximum percentage of regeneration was occurred via derived calli from hypocotyl in MS medium supplemented with 0.1 mg/L BAP and 0.5 NAA. The phytochemical assay revealed a considerable differences between natural habitats and <em>invitro</em> regenerated plants. For example the percentage of &alpha;-Pinene in plants derived from natural habitats and <em>invitro</em> conditions were 27 and 1.53 respectively. The yield of essential oils were 2.26 and 0.64 (ml/100g D.M.) in natural habitats and <em>invitro</em> regenerated plants respectively. The result of PCR assay and differences of banding patterns, indicated genetic variation between tissue cultured samples.<br> Conclusion: The results indicated that <em>invitro</em> culture conditions had a considerable effect on genome and metabolome &nbsp;&nbsp;of <em>Ferulago angulate</em>.</div> Ferulago angulata , اسانس, تنظیم‌کننده‌های رشد,تنوع سوماکلونال Ferulago angulata, callus induction, plant growth regulator, Somatic embryogenesis 176 189 http://jmp.ir/browse.php?a_code=A-10-1799-1&slc_lang=fa&sid=1 Lia Shooshtary لیا شوشتری l_shooshtary@yahoo.com 100319475328460041218 100319475328460041218 Yes Department of Plant Breeding, College of Agriculture, Kermanshah Branch, Islamic Azad University, Kermanshah, Iran گروه اصلاح نباتات، دانشکده کشاورزی، واحد کرمانشاه، دانشگاه آزاد اسلامی، کرمانشاه، ایران Mansour Omidi منصور امیدی momidi@ut.ac.ir 100319475328460041219 100319475328460041219 No Department of Agronomy and Plant Breeding College of Agriculture and Natural Resources, University of Tehran, Karaj, Iran گروه زراعت و اصلاح نباتات، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی، دانشگاه تهران، کرج، ایران Ardeshir Qaderi اردشیر قادری ardeshir582008@gmail.com 100319475328460041220 100319475328460041220 No Medicinal Plants Research Center, Institute of Medicinal Plants, ACECR, Karaj,Iran مرکز تحقیقات گیاهان دارویی، پژوهشکده گیاهان دارویی، جهاد دانشگاهی، کرج، ایران Amir Reza Zare Karizi امیررضا زارع کاریزی amirrzare@gmail.com 100319475328460041221 100319475328460041221 No Medicinal Plants Research Center, Institute of Medicinal Plants, ACECR, Karaj,Iran مرکز تحقیقات گیاهان دارویی، پژوهشکده گیاهان دارویی، جهاد دانشگاهی، کرج، ایران Ali Mehrafarin علی مهرآفرین a.mehrafarin@gmail.com 100319475328460041222 100319475328460041222 No Medicinal Plants Research Center, Institute of Medicinal Plants, ACECR, Karaj,Iran مرکز تحقیقات گیاهان دارویی، پژوهشکده گیاهان دارویی جهاد دانشگاهی، کرج، ایران