fa تولید ریشه‌های مویین با استفاده از اگروباکتریوم رایزوژنز در گیاه دارویی تاتوره تماشایی (<i>Datura innoxia</i> L.) و بررسی اثر محرک‌های زیستی سالیسیلیک اسید و متیل جاسمونات بر محتوای آتروپین و اسکوپولامین بيوتكنولوژی Biotechnology پژوهشی Research <p dir="RTL" style="margin-right: 7.1pt; text-align: justify;"><strong>مقدمه:</strong> استفاده از <em><span dir="LTR">Agrobacterium rhizogenes</span></em> جهت ایجاد ریشه‌های مویین تراریخت، روش بسیار کارآمد برای افزایش متابولیت‌های ثانویه است.</p> <p dir="RTL" style="margin-right: 7.1pt; text-align: justify;"><strong>هدف:</strong> هدف از این تحقیق کشت ریشه‌های مویین تراریخت به منظور افزایش تولید متابولیت‌های ثانویه در گیاه تاتوره تماشایی است.</p> <p dir="RTL" style="margin-right: 7.1pt; text-align: justify;"><strong>روش بررسی:</strong> در این تحقیق تولید ریشه‌های مویین با تلقیح ریز نمونه‌های برگ و کوتیلدون حاصل از گیاهچه‌های 2 ماهه، توسط سویه‌های <span dir="LTR">A₄</span>، <span dir="LTR">A₇</span> و 15834 اگروباکتریوم رایزوژنز به دو روش درشت تزریقی و غوطه‌وری انجام شد و به منظور القای الیسیتور متیل جاسمونات در غلظت‌های 50 و 100 میکرو مولار و سالیسیلیک اسید در غلظت‌های 1، 01/0 و 1/0 میلی‌مولار در قالب طرح کاملاً تصادفی در سه تکرار کشت داده شدند و محتوای آتروپین و اسکوپولامین ریشه‌های مویین تراریخت تحت غلظت‌های مذکور توسط <span dir="LTR">HPLC</span> بررسی شد.</p> <p dir="RTL" style="margin-right: 7.1pt; text-align: justify;"><strong>نتایج:</strong> بیشترین و کمترین تولید ریشه مویین تراریخته به ترتیب مربوط به سویه <span dir="LTR">A₄</span> و سویه 15834 بود. بهترین ریز نمونه جهت تولید ریشه‌های مویین با تلقیح برگ در سویه <span dir="LTR">A₄</span> و کوتیلدون در سویه <span dir="LTR">A₇</span> گزارش شد. روش درشت تزریقی با بیشترین تولید ریشه مویین تراریخته به عنوان برترین روش شناسایی شد. اثر محرک‌های سالیسیلیک اسید در غلظت 1/0 میلی مولار سبب افزایش 3/4 برابری محتوای آتروپین در ریشه‌های مویین تراریخته نسبت به نمونه شاهد در غلظت مذکور شد. همچنین نتایج نشان داد، استفاده از متیل جاسمونات در غلظت‌های بالاتر (100 میکرو‌مولار) باعث کاهش محتوای آتروپین و اسکوپولامین می‌شود.</p> <p dir="RTL" style="margin-right: 7.1pt; text-align: justify;"><strong>نتیجه‌گیری:</strong> اگروباکتریوم به عنوان یک روش مناسب جهت تولید ریشه‌های مویین و الیسیتورهای هورمونی به عنوان تیمار مناسب برای افزایش آلکالوئیدهای مورد نظر می‌توانند ایفای نقش کنند<span dir="LTR">.</span></p> <p dir="RTL" style="margin-right:7.1pt;"></p> <p style="margin-left: 14.2pt; text-align: justify;"><strong>Background:</strong> Using <em>Agrobacterium rhizogenes</em> due to create hairy roots, is a useful method to increase secondary metabolites many plants.</p> <p style="margin-left: 14.2pt; text-align: justify;"><strong>Objective:</strong> Purpose of this research is to transgenic hairy roots culture, in order to produce secondary metabolites in <em>Datura innoxia</em>.</p> <p style="margin-left: 14.2pt; text-align: justify;"><strong>Methods:</strong> Explants leaf and cotyledon of <em>Datura innoxia</em> were inoculated for two months with A7, A4 and 15834 strains of <em>Agrobacterium rhizogenes</em>; Furthermore injection and Immersion methods were used in this scrutiny. The presence of T-DNA in transgenic hairy roots were confirmed by PCR. Transgenic hairy roots in liquid medium of 1/2MS were cultured. In order to induct elicitors, methyl jasmonate in tow densities of 50&micro;M and 100&micro;M, and salicylic acid in three densities of 1mM, 0.1mM and 0.01 mM were used randomly three times. Atropine and scopolamine content of transgenic hairy roots were examined by HPLC.</p> <p style="margin-left: 14.2pt; text-align: justify;"><strong>Results:</strong> The highest and lowest rate of transgenic hairy roots production was respectively related to the strains of A4 and 15834. Best explants for inoculation, leaf with A4 strain and cotyledon with A7 strain, were reported. With highest production rate of hairy roots, Simple deposit using a syringes method was recognized as the best method of inoculation. The effect of salicylic acid at a density of 0.1 mM increases the content of atropine concentrations. Also the results showed that usage of Methyl jasmonate at higher doses (100 &micro;M) reduces the content of atropine and scopolamine.</p> <p style="margin-left: 14.2pt; text-align: justify;"><strong>Conclusion:</strong> <em>A. rhizogenes</em> as an appropriate method to produce hairy roots and elicitors the best treatment for increase alkaloids.</p> <div style="text-align: justify;"><p style="margin-left:14.2pt;"></p><p style="margin-left:14.2pt;"></p></div> آتروپین, اسکوپولامین, الیسیتور, تاتوره تماشایی, ریشه‌های مویین Datura innoxia, Atropine, Elicitors, Hairy roots Scopolamine 141 155 http://jmp.ir/browse.php?a_code=A-10-1464-1&slc_lang=fa&sid=1 S Ghadermazi سمیه قادرمزی 100319475328460041430 100319475328460041430 No Department of Horticulture, Karaj Branch, Islamic Azad University, Karaj, Iran دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه باغبانی، واحد کرج، دانشگاه آزاد اسلامی، کرج، ایران M Tohidfar مسعود توحیدفر M_Tohidfar@sbu.ac.ir 100319475328460041431 100319475328460041431 Yes Department of Biotechnology, Faculty of Engineering, Energy and New Technology, Shahid Beheshti University, Tehran, Iran کرج، گروه باغبانی، واحد کرج، دانشگاه آزاد اسلامی SM Miri سیدمهدی میری 100319475328460041432 100319475328460041432 No Department of Horticulture, Karaj Branch, Islamic Azad University, Karaj, Iran استادیار، گروه باغبانی، واحد کرج، دانشگاه آزاد اسلامی، کرج، ایران